一、细胞简介

细胞简介

alpha TC1 clone 6是1988年从患有腺瘤的小鼠胰腺中分离出来的α细胞系。它是从表达SV40大T抗原癌基因的转基因小鼠在大鼠胰高血糖素前原启动子控制下产生的腺瘤中克隆出来的。alpha TC1 clone 6是一株胰腺Alpha细胞株。 它从alpha TC1细胞株克隆而来，而alpha TC1细胞株是从转染了大鼠前高血糖素原启动子控制下的SV40大T抗原抗癌基因的转基因小鼠中产生的腺癌中得到的。 其亲本细胞株是低分化的，既产生高血糖素又产生胰岛素。 两个克隆细胞株，alpha TC1 clone 6和alpha TC1 clone 9 分化程度较高并且只产生高血糖素。 Alpha TC1 clone 6表现的分化程度最高，表达的高血糖素水平也最高。 .The alpha TC1 clone 6对研究胰岛的许多生物学特性包括高血糖素的生物合成及细胞分裂素类敏感性都很有用。

细胞名称

alpha TC1 clone 6 小鼠胰腺细胞

细胞别称

alpha TC1 clone 6; alphaTC clone 6; alpha-TC1.6; alphaTC1.6; alpha-TC1-6; alpha TC1-6; alpha TC1.6; aTC1 Clone 6; aTC1-6

细胞货号

HBCC27088

来源

小鼠；胰腺

细胞形态

上皮样

生长特性

贴壁、松散连接的簇群和悬浮的单细胞

培养条件

MEM含NEAA培养基；优质胎牛血清10%；双抗1%。请注意细胞消化需用细胞解离缓冲液

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法（轻微贴壁）

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2、加入细胞解离缓冲液于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化2-3分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3、将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

注意事项

无需消化，轻拍培养瓶细胞即可脱落

四、细胞冻存方法

冻存液配方

冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配（推荐使用DELF无血清非程序细胞冻存液HBCC16090进行冻存细胞，快速，便捷）。

冻存规格

按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

冻存方法

1、消化并离心收集细胞，计数，推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml；
2、将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3、将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存;

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。