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C1498小鼠急性骨髓性白血病细胞

一、细胞简介

细胞简介

C1498 是从患有急性髓性白血病的雌性小鼠中分离出来的淋巴母细胞。它在免疫系统疾病研究中具有应用。该细胞不表达 B7-1。它们对 0.1 mM 皮质醇具有抵抗力。检测结果显示,鼠痘病毒(鼠痘)呈阴性。

细胞名称

C1498小鼠急性骨髓性白血病细胞

细胞别称

C1498

细胞货号

HBCC16651

来源

C57BL/6J 小鼠;白血病

细胞形态

淋巴母细胞

生长特性

悬浮生长

培养条件

DMEM培养基;优质胎牛血清+10%;双抗+1%。

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法(悬浮细胞)

传代比例

1:2(不同细胞情况具体对待)

传代方法

1、当细胞量达到 8-10×105cell/ml 时,可进行传代;

2、在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的细胞悬液至离心管中;

31000rpm 离心 5min,离心完成后,弃上清;

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬,调整细胞密度为2-4×105cell/ml,均匀铺于2个新的培养瓶中,每瓶约6-8ml

5、水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于 37℃,5%CO2 培养箱中静置培养;

注意事项

少数聚团贴壁的细胞无需消化,轻晃动培养瓶或吹打就会脱落

四、细胞冻存方法

冻存液配方

冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

冻存规格

建议每瓶T25瓶冻存1支。

冻存方法

1、待细胞生长状态良好时,即可进行细胞冻存;

2、收集细胞悬液,计数;

31000rpm 离心 5min,离心完成后,弃上清;

4、加入细胞冻存液重悬细胞沉淀,调整细胞密度为2×106 cell/ml,轻轻混匀后,将细胞悬液加入冻存管,1ml/支。

5、将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;

6、次日取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存;

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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