一、细胞简介

细胞简介

‌Expi293F细胞是Expi293表达系统的核心组分，来源于人胚肾细胞293[HEK-293]细胞系，是293F细胞的一个亚克隆。Expi293F细胞保持悬浮培养，在Expi293表达培养基中可生长直至达到高密度。‌ 相比适应Expi293表达培养基的其他293细胞，Expi293F细胞表现出生长更快且存活率更高的生长特性，同时Expi293F细胞具有高度可转染性，并且在瞬时蛋白表达中产生较高产量的外源蛋白质得率‌。‌可广泛适用于高产量表达的蛋白生产、重组抗体表达‌、四环素诱导细胞‌蛋白表达、工业化生物反应器等应用方向。

细胞名称

Expi293F人胚肾细胞

细胞别称

Expi293F

细胞货号

HBCC17739

来源

人 女 胎儿，胚肾

细胞形态

上皮样细胞

生长特性

悬浮生长

鉴定报告

提供STR鉴定

培养条件

推荐使用Expi293F细胞专用培养基（货号：HBCC28717）。

不需要另外添加血清等其他成分。为我公司研发改良产品。

注意：Expi293F细胞悬浮细胞生长，传代培养需在二氧化碳培养箱中用水平孵育摇床摇晃培养瓶水平震荡培养，摇床速度为 80-100RPM。细胞生长速度快，注意及时换液传代。复苏后每隔24小时对细胞进行计数，建议细胞浓度在2-3×10^6/ml时进行传代，传代后浓度推荐为10^6/ml，冻存密度推荐为1-2×10^7/管。该细胞我公司只提供冻存管包装发货，发二管保其中一管。

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到4-6mL基础培养基（含10%FBS）的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

传代比例1: 2-1:3，传代周期2-3天

传代方法

1、当细胞量达到8-10×10⁵cell/ml 时，可进行传代；

2、在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的细胞悬液至离心管中；

3、1000rpm 离心 5min，离心完成后，弃上清；

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬，调整细胞密度为2-4×10⁵cell/ml，均匀铺于2个新的培养瓶中，每瓶约6-8ml；

5、水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5%CO₂ 培养箱中静置培养；

注意事项

注意收集悬浮的细胞以及可能贴在瓶底的细胞

四、细胞冻存方法

冻存液配方

RHBCC640培养液82%+10%FBS+DMSO 8% 现用现配。

冻存规格

建议每瓶T25瓶冻存1支。

冻存方法

1、待细胞生长状态良好时，即可进行细胞冻存；

2、收集细胞悬液，计数；

3、1000rpm 离心 5min，离心完成后，弃上清；

4、加入细胞冻存液重悬细胞沉淀，调整细胞密度为2×10⁶cell/ml，轻轻混匀后，将细胞悬液加入冻存管，1ml/支。

5、将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；

6、次日取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存；

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂