一、细胞简介

细胞简介

C4-2是从人前列腺癌LNCaP细胞皮下去势小鼠异种移植瘤中分离的具有上皮样形态的细胞系。LNCaP细胞分离自前列腺癌淋巴结转移的患者。该细胞系的特性:向培养基分泌前列腺特异性抗原。应用:前列腺癌致瘤性、雄激素非依赖性进展和骨转移人前列腺癌细胞系ln cap(1×106个细胞；段落# 29 ),如Horoszewiez，JS等在癌症研究43:1809-1818，1983中所述；与来自骨肉瘤的(1×106)人成纤维细胞(细胞系MS)共接种到无胸腺雄性裸鼠中。在培养8周后，将裸鼠宿主阉割。总共12周后切除肿瘤样本。C4细胞系构成了从鼠宿主肿瘤生长的体外培养的亚系。当C4亚系随后与MS骨肉瘤成纤维细胞在阉割的无胸腺雄性裸鼠宿主中共接种另外12周时，通过上述相同的方案。从该宿主中产生的肿瘤培养的前列腺上皮细胞构成了C4-2亚系。致瘤性和骨转移:在完整和阉割的无胸腺雄性裸鼠中原位施用1×10⁶个重悬的C4-2细胞产生100%的致瘤性在完整的和去势的鼠宿主中都检测到骨质前列腺癌转移。细胞又名LNCAP C4-2细胞。

细胞名称

LNCaP C4-2人前列腺癌细胞

细胞别称

LNCaP C4-2

细胞货号

HBCC17143

来源

人前列腺癌LNCaP细胞

细胞形态

上皮样细胞

生长特性

贴壁细胞

培养条件

准备DMEM/F12基础培养基，优质胎牛血清10%, ITS 1% P/S1%

培养环境

培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

四、细胞冻存方法

冻存液配方

冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

冻存规格

按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

冻存方法

1、消化并离心收集细胞，计数，推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml；
2、将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3、将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存;

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。