一、细胞简介

细胞简介

VK2/E6E7 是一种上皮细胞系，于 1996 年从一位因子宫内膜异位症而接受子宫切除术的 32 岁女性患者的阴道粘膜中分离出来。

细胞名称

VK2/E6E7 人子宫内膜异位症阴道粘膜上皮细胞

细胞别称

Vk2/E6E7; VK-2/E6E7; VK2 (E6/E7); VK2

细胞货号

HBCC17083

来源

32岁；女性；阴道粘膜

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

贴壁细胞

培养条件

VK2/E6E7细胞专用培养基（货号：HBCC17088）

包含：

1、VK2/E6E7细胞基础培养基 490mL（发货原装500ml ，2-8℃）；

2、VK2/E6E7细胞细胞培养添加剂 5mL（-20℃保存）；

3、双抗 5mL（货号：Delf-15487   -20℃保存）。

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含10%FBS的常规培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的T25培养瓶（或6cm皿）中37℃培养箱培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化2min左右（不同胰酶，消化时间不同，要根据细胞脱落情况，在进行终止消化）；
5、轻轻侧拍T25培养瓶镜下观察，消化到细胞脱落在胰酶当中后，加入2-3ml含10%FBS的常规培养基终止消化；
6、1000rpm离心5min，收集到15ml离心管中加2ml该细胞完全培养基，重悬细胞时，在离心管中轻轻吹打，把细胞混匀；
7、按1:2分配到新的T25培养瓶中，添加4-5ml完全培养基放回37℃培养箱；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

四、细胞冻存方法

冻存液配方

推荐使用DELF无血清非程序细胞冻存液 货号：HBCC16090。

冻存规格

按每 1ml冻存液含 1×106~1×107 个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到 冻存管中，标注好名称、代数、 日期等信息。

冻存方法

1、消化并离心收集细胞，计数，推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml（本公司是1个T25培养瓶长满冻存1支冻存管）；
2、将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3、将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存;

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂