一、细胞简介

细胞简介

由1991年患有中度分化子宫内膜腺癌(G2级)的68岁妇女的原发肿瘤建立；文献中描述的细胞表达雄激素受体(据报道雄激素抑制细胞增殖)，但无雌激素受体；文献中描述的细胞在裸鼠中是致瘤的。

细胞名称

MFE-296人子宫内膜癌细胞

细胞别称

MFE 296; MFE296

细胞货号

HBCC16712

来源

68 岁女性 子宫内膜腺癌(G2级)

细胞形态

上皮样多形性细胞

生长特性

单层贴壁生长

培养条件

准备RPMI-1640基础培养基和MEM基础培养基按1:1配比，优质胎牛血清 20%,GlutaMAX-1谷氨酰胺1%, ITS（胰岛素+转铁蛋白+硒） 1% ,P/S +1%,

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

四、细胞冻存方法

冻存液配方

冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配（推荐使用DELF无血清非程序细胞冻存液HBCC16090进行冻存细胞，快速，便捷）。