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人原代CD3+T淋巴细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于人的外周血样本。

T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。T细胞是相当复杂的不均一体、又不断在体内更新、在同一时间可以存在不同发育阶段或功能的亚群,按免疫应答中的功能不同,可将T细胞分成若干亚群:辅助性T细胞(Helper T cells,Th)、抑制性T细胞(Suppressor T cells,Ts)、效应T细胞(Effector T cells,Te)、细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、迟发性变态反应T细胞(Delayed type hypersensitivityT cells,Td)、放大T细胞(Ta),、原始的或天然T细胞(Naive T cells)、记忆T细胞(Memory T cell,Tm)。

T细胞是淋巴细胞的主要组分,它具有多种生物学功能,如直接杀伤靶细胞,辅助或抑制B细胞产生抗体,对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等,T细胞产生的免疫应答是细胞免疫,细胞免疫的效应形式主要有两种:与靶细胞特异性结合,破坏靶细胞膜,直接杀伤靶细胞;另一种是释放淋巴因子,最终使免疫效应扩大和增强。

细胞名称

人原代CD3+T淋巴细胞

细胞别称

Human primary CD3+T lymphocytes

细胞货号

HBCC24623

来源

外周血

细胞形态

淋巴细胞样

生长特性

悬浮生长

培养条件

推荐使用DELF原代T淋巴细胞专用培养基来培养该细胞

名称

体积

浓度

保存条件

原代T淋巴细胞基础培养基

500ml

4℃、避光

原代T淋巴细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

终浓度10%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法(悬浮细胞)

传代比例

1:2(不同细胞情况具体对待)

传代方法

1、当细胞量达到 8-10×105cell/ml 时,可进行传代;

2、在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的细胞悬液至离心管中;

31000rpm 离心 5min,离心完成后,弃上清;

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬,调整细胞密度为2-4×105cell/ml,均匀铺于2个新的培养瓶中,每瓶约6-8ml

5、水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于 37℃,5%CO2 培养箱中静置培养;

注意事项

注意收集悬浮的细胞

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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