湖北省工业微生物菌种保藏与研究中心
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大鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于鼠的正常颌骨组织样本。

颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cell,JBMMSC)是存在于上下颌骨内的一种具有较强增殖能力和多向分化潜能的成体干细胞。病理因素、理化因素及生物因素均可影响JBMMSC的生物学特性。在骨髓中,BMSCs占骨髓有核细胞总数的0.001%~0.1%,含量极低。

而同时,由于组织工程需要大量的种子细胞,从啮齿类动物骨髓分离BMSCs的技术上的难度限制了许多实验的开展。体外分离培养纯度高、活力强、生物特性均一的BMSCs对组织工程及细胞的体内、体外实验显得至关重要。

细胞名称

鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞

细胞别称

Rat primary mandibular bone marrow mesenchymal stem cells

细胞货号

HBCC28725

来源

鼠;正常颌骨

细胞形态

长梭形细胞,不规则细胞

生长特性

贴壁生长

鉴定报告

提供免疫荧光鉴定(波形蛋白 Vimentin 免疫荧光染色为阳性)

培养条件

推荐使用大鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞专用培养基(货号:HBCC28726来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

大鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞基础培养基

440ml

4℃、避光

大鼠原代颌骨骨髓间充质干细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

终浓度10%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL基础培养基(含10%FBS)的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法

传代比例

1:2(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸走润洗的PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞小部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml基础培养基(含10%FBS)终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较小,可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂

1、DELF培养箱水盘除菌剂(100x)

100ml

HBCC28683

2、DELF水浴锅除菌剂(1000x)  

100ml

HBCC28682

3、DELF细胞污染高效清除剂(2000×)

500ul

HBCC16332

4、DELF黑胶虫清除试剂(500x)

400ul

HBCC11609

5、DELF支原体清除试剂(1000x)

1ml  

HBCC17027

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