湖北省工业微生物菌种保藏与研究中心
19537860770

小鼠CD3+T淋巴细胞(阳选)

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于小鼠的外周血样本。

T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。

细胞名称

小鼠CD3+T淋巴细胞(阳选)

细胞别称

Mouse CD3+T lymphocytes (positive selection)

细胞货号

HBCC24622

来源

小鼠外周血

细胞形态

淋巴细胞样

生长特性

悬浮生长

培养条件

推荐使用DELF原代T淋巴细胞专用培养基来培养该细胞

名称

体积

浓度

保存条件

原代T淋巴细胞基础培养基

500ml

4℃、避光

原代T淋巴细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

终浓度10%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法(悬浮细胞)

传代比例

1:2(不同细胞情况具体对待)

传代方法

1、当细胞量达到 8-10×105cell/ml 时,可进行传代;

2、在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的细胞悬液至离心管中;

31000rpm 离心 5min,离心完成后,弃上清;

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬,调整细胞密度为2-4×105cell/ml,均匀铺于2个新的培养瓶中,每瓶约6-8ml

5、水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于 37℃,5%CO2 培养箱中静置培养;

注意事项

注意收集悬浮的细胞

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

湖北省工业微生物菌种菌种保藏与研究中心
业务咨询:19537860770、15827658430
Email : hbcicc@fomail.com
邮编:430030