湖北省工业微生物菌种保藏与研究中心
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人原代子宫内膜异位症间充质干细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于人的子宫组织样本。

子宫内膜异位症是妇科常见疾病,可影响5-10%的育龄期妇女,在不孕症患者中患病率高达20-50%,虽为良性疾病,缺具有无限生长、生成新生血管、浸润并破坏周围组织、局部或远处转移等恶性肿瘤的一些特性。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源于胚胎时期的中胚层组织,具有很强的自我复制和多向分化潜能,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力,运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景,目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。体外培养的子宫内膜干细胞细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。

细胞名称

人原代子宫内膜异位症间充质干细胞

细胞别称

Human primary endometrial stromal stem cells

细胞货号

HBCC18016

来源

人;子宫

细胞形态

长梭形,不规则细胞

生长特性

贴壁培养

鉴定报告

提供免疫荧光鉴定(波形蛋白 Vimentin 免疫荧光染色为阳性)

培养条件

推荐使用人原代子宫内膜异位症间充质干细胞专用培养基货号:HBCC26341来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

人原代子宫内膜异位症间充质干细胞基础培养基

500mL

4℃、避光

人原代子宫内膜异位症间充质干细胞培养添加剂

25mL

2

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL基础培养基(含10%FBS)的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法

传代比例

1:2(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸走润洗的PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞大部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml10%FBS的基础培养基终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大,可根据细胞形态判断消化进程

、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂

1、DELF培养箱水盘除菌剂(100x)

100ml

HBCC28683

2、DELF水浴锅除菌剂(1000x)  

100ml

HBCC28682

3、DELF细胞污染高效清除剂(2000×)

500ul

HBCC16332

4、DELF黑胶虫清除试剂(500x)

400ul

HBCC11609

5、DELF支原体清除试剂(1000x)

1ml  

HBCC17027

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