一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于小鼠的正常肝组织。

随着人们生活水平的提高，饮食习惯的改变，肿瘤发病率也在不断的增加，如肝癌、胃癌和大肠癌等明显增加的趋势。肝脏作为人体重要的器官，在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的功能。肝脏也是体内药物代谢的重要器官，体内复杂的环境对药物代谢等的影响是不言而喻的。但是在体研究药物或其它化学物质在肝细胞代谢的分子机制有一定的困难，因此我们建立体外的原代肝细胞培养模型用于肝细胞分子生物学特征的研究，作为对在体肝脏研究模型的有益补充。采用改良的灌流方法将肝脏中的肝实质细胞分离、纯化、体外培养，全面分析原代肝细胞的生长和功能状态，为肝细胞分子生物学特征的研究以及新药对肝脏的作用机制的研究提供更有价值的线索，以更好的解释药物作用的机制。

细胞名称

小鼠原代肝实质细胞

细胞别称

Mouse primary liver parenchymal cells

细胞货号

HBCC11076

来源

小鼠；正常肝

细胞形态

上皮样，多角形细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代肝实质细胞专用培养基来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

原代肝实质细胞基础培养基

500ml

1×

4℃、避光

原代肝实质细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

25ml

终浓度5%

-20℃、避光

双抗（青霉素/链霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。