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人原代骨髓肥大细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于人的骨髓组织。

肥大细胞(Mast cell, MC)是和血液的嗜碱粒细胞一样,具有强嗜碱粒颗粒的组织细胞,细胞核小,位于细胞中央。

细胞名称

人原代骨髓肥大细胞

细胞别称

Primary human bone marrow mast cells

细胞货号

HBCC16739

来源

人;骨髓

细胞形态

圆形或卵圆形细胞

生长特性

悬浮生长

培养条件

推荐使用DELF原代肥大细胞专用培养基来培养该细胞

名称

体积

浓度

保存条件

原代肥大细胞基础培养基

500ml

4℃、避光

原代肥大细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50ml

终浓度10%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法(悬浮细胞)

传代比例

1:2(不同细胞情况具体对待)

传代方法

1、当细胞量达到 8-10×105cell/ml 时,可进行传代;

2、在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的细胞悬液至离心管中;

31000rpm 离心 5min,离心完成后,弃上清;

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬,调整细胞密度为2-4×105cell/ml,均匀铺于2个新的培养瓶中,每瓶约6-8ml

5、水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于 37℃,5%CO2 培养箱中静置培养;

注意事项

注意收集悬浮的细胞

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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