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人原代小气道上皮细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于正常支气管组织。

人小气道上皮细胞分离自小气道;临床上通常将内径小于2mm的小细支气管称为小气道。小气道具有气流阻力小,但易阻塞的特点。在平静吸气时,空气进入狭窄的鼻咽部,产生涡流。由于小气道已无软骨支持,在脱离纤维鞘嵌入肺组织后,管腔通畅性不象软骨性气道,易于受胸腔的压力变化的影响。
小气道上皮细胞形成连续呼吸道内层,作为隔绝外界有害物质的物理和功能屏障发挥着独特的作用。小气道位于肺泡和气管的交界处,这些细胞在功能上能够调节免疫反应、产生化学因子进行宿主防御、表达粘附分子,并可能通过HLA-DR表达呈递抗原;它们还能产生液体有助于肺液的平衡。
许多呼吸道疾病,如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纤维化,都涉及呼吸道表面上皮细胞的破坏;小气道上皮细胞的培养可为防止呼吸道扩增疾病和重塑提供新的治疗选择。

小气道的生理功能特点:①小气道阻力小;②气流速度慢;③可调节控制通气与血流比例。

细胞名称

人原代小气道上皮细胞

细胞别称

Primary human small airway epithelial cells

细胞货号

HBCC16275

来源

正常支气管

细胞形态

上皮样细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代上皮细胞专用培养基来培养该细胞

名称

体积

浓度

保存条件

原代上皮细胞基础培养基

500ml

4℃、避光

原代上皮细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

10ml

终浓度2%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法

传代比例

1:2(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸走润洗的PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞大部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心3-5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大,可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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