一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于人的正常食管组织样本。

食管是咽和胃之间的消化管，哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层、外膜。其中上皮细胞主要在黏膜层，其上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。食管损伤、从而导致食管长期的慢性炎症、溃疡，或慢性刺激，进而食管上皮增生，最后导致癌变。实验证明，弥漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病变。在食管癌的发生中，上皮-间质转化( EMT)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程，有利于肿瘤转移。

细胞名称

人原代食管上皮细胞

细胞别称

Primary human esophageal epithelial cells

细胞货号

HBCC10776

来源

人；正常食管

细胞形态

铺路石状细胞，不规则细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代上皮细胞专用培养基来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

原代上皮细胞基础培养基

500ml

1×

4℃、避光

原代上皮细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

10ml

终浓度2%

-20℃、避光

双抗（青霉素/链霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。