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人原代输尿管上皮细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于的正常输尿管组织。

输尿管上接肾盂,下连膀胱,是一对细长的管道,呈扁圆柱状,管径平均为0.5-0.7厘米。成人输尿管全长25-35厘米,位于腹膜后,沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管管壁为三层组织所构成。最外系筋膜组织,包围着整个肾盂和输尿管,其中有丰富的血管和神经纤维;中间为三层肌肉,其内外层为纵行肌,中层为环形肌;最里为粘膜层,与肾盂及膀胱粘膜是连贯的。粘膜下层有丰富的网状淋巴管,是肾脏向下、膀胱向上感染的途径之一。

输尿管上皮是是输尿管生物学研究的基础,输尿管粘膜表面为移行上皮,约有4-5层细胞。输尿管上皮的研究在尿路上皮肿瘤的研究、输尿管损伤的研究以及一些组织工程学研究中是非常热门的方向。

细胞名称

人原代输尿管上皮细胞

细胞别称

Primary human ureteral epithelial cells

细胞货号

HBCC10643

来源

;正常输尿管

细胞形态

铺路石状细胞,不规则细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代上皮细胞专用培养基来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

原代上皮细胞基础培养基

500mL

4℃、避光

原代上皮细胞培养添加剂

5mL

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

10mL

终浓度2%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法

传代比例

1:2(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸走润洗的PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞大部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心3-5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大,可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

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