一、细胞简介

细胞简介

该细胞是由Lozzio从一名53岁的慢性髓细胞性白血病急变期的女性患者的胸水中分离建立的。该细胞曾被认为来源于粒系，处于高度未分化阶段；Anderson等人作了细胞膜特性的研究后，认为该细胞是红白血病细胞系。该细胞是对自然杀伤细胞高度敏感的体外靶标，故而被广泛应用于这方面的研究。K562的原始细胞是一种具有多向分化潜能的造血系统的恶性肿瘤细胞，能自发分化为红系、粒系和单核系的可辨识的祖细胞。该细胞表达CD7（25％）。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带GFP基因。

细胞名称

K-562+GFP人慢性骨髓性白血病细胞绿色荧光标记

细胞别称

K-562+GFP

细胞货号

HBCC27131

来源

骨髓

细胞形态

淋巴母细胞样；圆形

生长特性

悬浮生长

培养条件

准备RPMI1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

冻存液

90%血清，10%DMSO，现用现配。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法（悬浮细胞）

传代比例

1:2（不同细胞情况具体对待）

传代方法

1、当细胞量达到 8-10×10⁵cell/ml 时，可进行传代；

2、在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的细胞悬液至离心管中；

3、1000rpm 离心 5min，离心完成后，弃上清；

4、准备两个新的T-25 培养瓶。向细胞沉淀加入完全培养基重悬，调整细胞密度为2-4×10⁵cell/ml，均匀铺于2个新的培养瓶中，每瓶约6-8ml；

5、水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于 37℃，5%CO₂ 培养箱中静置培养；

注意事项

注意收集悬浮的细胞

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。