一、细胞简介

细胞简介

毛囊干细胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一种。毛囊干细胞属于成体干细胞，具有，在体内处于静止状态，在体内培养活内环境作用下表现出惊人的增殖能力。研究发现，毛囊干细胞具有多向分化潜能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，参与皮肤创伤愈合的过程。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

细胞名称

羊肩部皮肤毛囊干细胞永生化

细胞别称

Sheep shoulder skin hair follicle stem cells immortalized

细胞货号

HBCC27082

来源

动物的正常肩部皮肤组织

细胞形态

铺路石状细胞，不规则细胞

生长特性

贴壁生长

鉴定报告

提供免疫荧光鉴定(波形蛋白 Vimentin 免疫荧光染色为阳性)

培养条件

推荐使用羊肩部皮肤毛囊干细胞永生化专用培养基（货号：HBCC27081）来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

羊肩部皮肤毛囊干细胞永生化基础培养基

460mL

1×

4℃、避光

羊肩部皮肤毛囊干细胞永生化培养添加剂

5mL

100×

-20℃、避光

特级胎牛血清

30ml

终浓度6%

-20℃、避光

P/s双抗

5mL

100×

-20℃、避光

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL基础培养基（含10%FBS）的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的基础培养基终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

四、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂