一、细胞简介

细胞简介

源自人肺腺癌，该肺组织仍处于分化状态。PC-9（以前称为PC-14）。PC-14 最初于1989 年作为源自人肺腺癌（未分化型）的细胞系存放在RIKEN生物资源中心。该生物资源中心通过短串联重复序列 (STR) DNA 分析发现该细胞系与 PC-9 相同，PC-9 是源自人肺腺癌（分化型）的细胞系。此错误识别发生在细胞系存放在 RIKEN 生物资源中心之前。细胞系的名称更改为 PC-9，以反映这一发现。PC-9/ Osimertinib细胞是有PC-9细胞耐奥希替尼药构建的耐药株，培养过程中建议使用 Osimertinib  100nM浓度维持，请务必在细胞贴壁后换入含药培养基，如需进行细胞实验，请至少提前一周撤药换成正常培养基。

细胞名称

PC-9 人肺癌细胞奥西替尼耐药株

细胞别称

PC-9/ Osimertinib

细胞货号

HBCC28732

来源

人肺腺癌组织pc9细胞

细胞形态

上皮细胞样

生长特性

多数贴壁少量悬浮

鉴定报告

提供STR鉴定

培养条件

RPMI-1640培养基（货号：HBCC16564）；优质胎牛血清+10%（货号：HBCC11405）；

P/S+1%（货号：HBCC15487）。

注：上皮样细胞，多数贴壁，圆形细胞和梭形细胞同时存在。传代冻存时请收集圆形悬浮细胞。培养过程中建议使用 Osimertinib 100nM浓度维持.

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL基础培养基（含10%FBS）的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；（注意收集悬浮细胞）
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的基础培养基终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同胰酶消化能力不同，根据消化状态决定

四、细胞冻存方法

冻存液配方

冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配（推荐使用DELF无血清非程序细胞冻存液HBCC16090进行冻存细胞，快速，便捷）。

冻存规格

按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

冻存方法

1、消化并离心收集细胞，计数，推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml；
2、将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3、将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存;

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂