湖北省工业微生物菌种保藏与研究中心
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猫原代骨骼肌卫星细胞

一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于正常肌肉组织。

骨骼肌卫星细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。

肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。

明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维(肌细胞)外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维(肌细胞)表面;当肌纤维(肌细胞)受损后,肌卫星细胞可增殖分化,参与肌纤维(肌细胞)的修复,因此具有干细胞性质。

细胞名称

猫原代骨骼肌卫星细胞

细胞别称

Feline primary skeletal muscle satellite cells

细胞货号

HBCC28695

来源

正常肌肉

细胞形态

长梭状细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代骨骼肌细胞专用培养基来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

原代骨骼肌细胞基础培养基

500ml

4℃、避光

原代骨骼肌细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

50mL

终浓度10%

-20℃、避光

双抗(青霉素/链霉素,P/S)

5mL

100×

-20℃、避光

培养环境

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻;
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀;
3、在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞;
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养;

三、细胞传代方法

传代比例

1:2(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次,吸走润洗的PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞大部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心3-5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大,可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

细胞培养清除试剂

1、DELF培养箱水盘除菌剂(100x)

100ml

HBCC28683

2、DELF水浴锅除菌剂(1000x)  

100ml

HBCC28682

3、DELF细胞污染高效清除剂(2000×)

500ul

HBCC16332

4、DELF黑胶虫清除试剂(500x)

400ul

HBCC11609

5、DELF支原体清除试剂(1000x)

1ml  

HBCC17027

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