一、细胞简介

细胞简介

该细胞来源于兔的正常气管组织。

哮喘是一种常见的气道慢性炎症性疾病，目前我国有约 2000 万人罹患哮喘。近些年，由于雾霾等空气质量与环境污染程度的日益恶劣，呼吸系统疾病也逐渐成为了全世界范围影响人类健康最严重的慢性疾病之一，据世界卫生组织预测，到2025年，世界上将会有 4 亿人患上哮喘。哮喘发病症状众多，早期表现为过敏性炎症，后期由于气管平滑肌增生，阻塞气管，导致气道狭窄、气道高反应及气道重塑，患者出现胸闷、气喘等症状，严重时危及生命。因此，对哮喘的发病机理与治疗的研究是至关重要的。在对哮喘发病机制的研究中，气管平滑肌是针对气道阻塞性症状的主要研究目标之一，针对气管平滑肌细胞( airway smooth muscle cells，ASMCs) 的形态学观察与细胞增殖速率的测量是在细胞生物学水平研究哮喘发病机制的常用手段。

细胞名称

兔原代气管平滑肌细胞

细胞别称

Rabbit tracheal smooth muscle cells

细胞货号

HBCC11223

来源

兔；正常气管

细胞形态

长梭形细胞，不规则细胞

生长特性

贴壁生长

培养条件

推荐使用DELF原代平滑肌细胞专用培养基来培养该细胞。

名称

体积

浓度

保存条件

原代平滑肌细胞基础培养基

500ml

1×

4℃、避光

原代平滑肌细胞培养添加剂

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

50ml

终浓度10%

-20℃、避光

双抗（青霉素/链霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培养环境

气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

二、细胞复苏方法

复苏步骤

1、将冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻；
2、加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀；
3、在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞；
4、将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养；

三、细胞传代方法

传代比例

1:2（具体情况视细胞生长速度及密度决定）

传代方法

1、尽量吸干净T25瓶原培养基；
2、用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次，吸走润洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

注意事项

不同品牌胰酶消化时间差别较大，可根据细胞形态判断消化进程

五、注意事项

注意事项

1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

3、本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。